NRP1对非小细胞肺癌放射敏感性的影响
董娟聪，张海芹，高辉，韩海玲，孟可，金顺子
基金项目：国家高校博士点基金（No.2012006111） 作者简介：董娟聪(1983-)，女，博士研究生，主要从事放射医学研究 通信联系人：金顺子（1965-），女，教授，主要从事辐射免疫学和辐射肿瘤学的研究.

（吉林大学公共卫生学院,卫生部放射生物重点实验室）

摘要：目的：探讨NRP1与不同种类非小细胞肺癌细胞株放射敏感性的关系，并筛选辐射抗性最强的细胞株，以便进一步研究NRP1在非小细胞肺癌产生辐射抗性中的作用机制。方法：通过Western blot 技术检测不同来源的 5 种人非小细胞肺癌细胞株(H358、H460、H1299、A549、SK-MES-1) NRP1的基础表达水平，使用深部X光机对5株细胞进行不同剂量照射，通过MTT实验比较肿瘤细胞的辐射敏感性，初步筛选辐射敏感性最高与最低的 2 种细胞；10 进一步采用克隆形成实验、划痕实验及流式细胞术分别检测细胞存活分数、迁移能力及凋亡率的变化，分析 2 种细胞克隆形成能力、迁移及凋亡率与细胞放射敏感性的关系，并采用Western blot检测照射后 2 种细胞 NRP1 的表达变化。结果：5 种肿瘤细胞NRP1表达量由高到低依次为：A549> SK-MES-1> H358> H460>H1299；X射线对肿瘤细胞的抑制能力随着照射剂量的增加而增强，其抑制率由强到弱依次为：H460> H1299> H358> SK-MES-1> 15 A549，因此选取A549 细胞和 H460 细胞做后续研究。克隆形成实验显示，A549 在 2 Gy照射下的存活分数（SF2）是0.8872，而H460 细胞为0.3134。X 射线对A549 的迁移抑制力弱于 H460，10 Gy X射线作用后 H460 细胞的凋亡率明显高于 A549 细胞，并且受照后 A549 细胞 NRP1 的表达量上调。结论：在非小细胞肺癌细胞中 A549 的辐射敏感性最弱，且辐射抗性的形成可能与NRP1表达上调有关。 20
关键词： NRP1；非小细胞肺癌； A549；放射敏感性；辐射抗性
中图分类号：R811.5
Efects of NRP1 on radiosensitivity of non small cell lung cancer 25
DONG Juancong, ZHANG Haiqin, GAO HUI, HAN Hailing, MENG KE, JIN Shunzi
(Key Laboratory of Radiobiology, Ministry of Health,Jilin University)
Abstract: Objective: To explore the relation of NRP1with the radiosensitivity of different types of non-small cell lung cancer. Methods: The expression of NRP1on the cells of H358、H460、H1299、A549 and SK-MES-1was detected by Western blot .MTT was used to detect cell proliferation, and 30 selected two cells which were the highest and lowest radiosensitivity ; The SF、Migration and apoptosis rate was detected with Clonogenic assay, wound healing assay and flow cytometry respectively. Results：The expression levels of NRP1 in the five cell lines (A549> SK-MES-1> H358> H460> H1299) were all increased by degrees in order．The radiosensitivity of five NSCLC cell lines were showed a dose-dependent decrease (A549Key words: Neuropilin 1; non-small cell lung cancer; A549; radiosensitivity; radioresistance